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Enzymologie élémentaire

Plan du cours

Objectifs

I - Les enzymes

1 - Définitions

2 - La réaction enzymatique

II - Cinétique

3 - Effet de la concentration d’enzyme

4 - Effet de la concentration de substrat

5 - Effet de la concentration des effecteurs

6 - Effets allostériques

7 - Cinétique à deux substrats

III - Effet des constantes physiques

8 - Effet du pH

9 - Effet de la température


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie II - Cinétique
Chapitre 4 - Effet de la concentration de substrat

 

4.22 - Diagramme de Lineweaver et Burk

 

Image EE_29_PICT.jpg
EE 29

  • Le graphe représentant cette fonction linéaire est appelé graphe en double inverse puisque les deux variables sont respectivement les inverses des variables de l’hyperbole précédente. Sur l’axe des x, les concentrations croissantes du substrat ont des inverses qui diminuent de sorte que le croisement des axes représente l’inverse d’une concentration infinie du substrat, alors que la plus petite concentration voit son inverse (2 / Km) repoussé à l’extrémité de l’axe. De même sur l’axe des y, les inverses des vitesses les plus lentes sont les plus haut situés. L’étude de cette fonction montre que l’ordonnée à l’origine est égale à l’inverse de la vitesse maximum. Le double de cette ordonnée correspond à l’inverse de la moitié de la vitesse maximum et par conséquent l’abscisse du point de la droite qui a cette ordonnée est l’inverse du Km. Une telle droite est facile à tracer à partir des mesures expérimentales pourvu qu’on exprime les résultats en inverses des vitesses initiales en fonction des inverses des concentrations de substrat choisies. Cette extrapolation permet de déterminer graphiquement les valeurs cherchées des constantes Vmax et Km.

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4.1 - Concentration du substrat
4.2 - Cinétique michaélienne
4.3 - Vitesse maximum
4.4 - Constante de Michaelis
4.5 - Exemple de Km : la lactate déshydrogénase
4.6 - Constantes de la réaction
4.7 - Exemple de constantes : la fumarase
4.8 - Exemple de constantes : l’aspartate aminotransférase = ASAT
4.9 - Exemple de constantes : la créatine phosphokinase
4.10 - Phase stationnaire
4.11 - Equation de la vitesse
4.12 - Equation de la conservation de l’enzyme
4.13 - Constante de Michaelis
4.14 - Exemple de Km : la glycérophosphate déshydrogénase
4.15 - Exemple de Km : l’anhydrase carbonique
4.16 - Exemple de Km : l’isocitrate déshydrogénase
4.17 - Calculs
4.18 - Calculs
4.19 - Equation de Michaelis & Menten
4.20 - Hyperbole de Michaelis-Menten
4.21 - Calculs
4.22 - Diagramme de Lineweaver et Burk