médecine
     Page précédentePage suivanteSommaireVersion imprimable
   
 

Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


Tous droits de reproduction réservés aux auteurs


traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie II - Préparation des acides nucléiques
Chapitre 8 - Synthèse des polynucléotides

 

8.7 - PCR (II-3)

 

Image BG_53_6_PICT.jpg
BG 53/6

  • La Taq polymérase, thermorésistante, a été inactivée mais pas dénaturée durant la phase de dénaturation de l’ADN.
  • En remontant la température à 72°C, l’enzyme recommence donc son activité. Elle catalyse la polycondensation des désoxyribonucléotides, qui se prolonge autant qu’il existe un brin complémentaire pour servir de modèle.
  • Le nouveau brin d’ADN formé à partir de l’amorce amont (côté 5’) et se prolonge vers la droite (côté 3’). L’autre brin d’ADN formé à partir de l’amorce aval (côté 5’) et se prolonge vers la droite (côté 3’). Sur les brins d’ADN (en jaune) synthétisés à partir des amorces au cycle précédent, la synthèse sera limitée au côté 5’ de l’amorce opposée, faute de modèle pour poursuivre. Seul le fragment d’intérêt sera répliqué sur ces nouveaux fragments.

     Page précédentePage suivanteSommaireVersion imprimable
   
 
8.1 - Polymerase Chain Reaction (PCR)
8.2 - PCR (I-1)
8.3 - PCR (I-2)
8.4 - PCR (I-3)
8.5 - PCR (II-1)
8.6 - PCR (II-2)
8.7 - PCR (II-3)
8.8 - PCR (III-1)
8.9 - PCR (III-2)
8.10 - PCR (III-3)
8.11 - Nested-PCR
8.12 - Phosphoramidites : dA-3’-support protégée
8.13 - Phosphoramidites : détritylation
8.14 - Phosphoramidites : addition d’un nucléotide
8.15 - Phosphoramidites : blocage des supports
8.16 - Phosphoramidites : oxydation
8.17 - Phosphoramidites : déprotection
8.18 - Synthèse d’un cDNA
8.19 - Sondes de cDNA amplifié
8.20 - Structures secondaires
8.21 - Synthèse des queues poly(dN)