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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.7
V. Morice
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Partie II - Préparation des acides nucléiques
Chapitre 8 - Synthèse des polynucléotides | | |
8.6 - PCR (II-2)
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| BG 53/5 |
- Les brins d’ADN nouvellement synthétisés ont répliqué le fragment d’intérêt et aussi la séquence complémentaire de l’amorce qui le suit.
- En refroidissant la température vers 50°C (un peu en-dessous des Tm des deux amorces) les fragments d’ADN dénaturé et les fragments d’ADN nouvellement synthétisés vont pouvoir s’hybrider à nouveau avec les amorces.
- Ainsi les brins orientés 5’→3’ de droite à gauche s’hybrideront avec l’amorce amont, orientée 5’→3’ de gauche à droite et les brins orientés 5’→3’ de gauche à droite s’hybrideront avec l’amorce aval, orientée 5’→3’ de droite à gauche.
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