Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.8 V. Morice
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Partie II - Préparation des acides nucléiques Chapitre 8 - Synthèse des polynucléotides | |
8.21 - Synthèse des queues poly(dN)
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BG 57 |
- La synthèse d’une queue poly(dN) est catalysée par la transférase terminale en présence de cations divalents : Mg++, Mn++, Co++
- L’ADN à allonger doit présenter une extrémité 3’ sortante ou à défaut un bout franc. C’est pourquoi il est utile de le digérer d’abord avec une enzyme de restriction comme Kpn I ou Pst I (bouts 3’ sortants) ou à défaut comme Pvu II (bouts francs).
- L’ion Co++ permet la condensation préférentielle du dCTP, donc la synthèse de queues poly(dC).
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