Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse

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traduction HTML V2.4
V. Morice

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8.10 - PCR (III-3)

BG 53/9

• En remontant la température à 72°C, l'enzyme recommence encore son activité. Elle catalyse la polycondensation des désoxyribonucléotides, qui se prolonge autant qu'il existe un brin complémentaire pour servir de modèle.
• Le nouveau brin d'ADN formé à partir de l'amorce amont (côté 5') et se prolonge vers la droite (côté 3'). L'autre brin d'ADN formé à partir de l'amorce aval (côté 5') et se prolonge vers la gauche (côté 3'). Sur les brins d'ADN (en jaune) synthétisés à partir des amorces au cycle précédent, la synthèse sera limitée au côté 5' de l'amorce opposée, faute de modèle pour poursuivre. Seul le fragment d'intérêt sera répliqué sur ces nouveaux fragments.
• Le nombre de copies de l'ADN d'origine avec une seule amorce-limite va continuer à croître arithmétiquement et le nombre de copies avec deux amorces-limites continuera à croître exponentiellement, jusqu'à ce que ces dernières, soient pratiquement pures dans l'ADN amplifié final.