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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.4 V. Morice
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Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques Chapitre 5 - Les nucléases
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5.1 - Fragment de restriction (définition)
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| BG 20 |
- Les endonucléases de restriction sont des enzymes bactériennes participant à un mécanisme de défense des bactéries vis-à-vis des virus : système de restriction-méthylation.
- Elles catalysent la coupure de l'ADN non méthylé en des endroits caractérisés par une séquence spécifique de nucléotides (site de restriction). Les produits de cette digestion sont les fragments de restriction, dont la longueur, toujours la même pour un ADN donné, ne dépend que de la séquence primaire de cet ADN.
- L'analyse de la longueur des fragments de restriction, à la recherche de variations individuelles (polymorphismes de longueur des fragments de restriction = RFLP) est une des techniques d'analyse de la séquence primaire de l'ADN à la recherche de substitutions, d'insertions ou de délétions qui modifient le nombre de sites de restriction et donc la longueur des fragments de restriction.
- Les extrémités des fragments de restriction peuvent être formées de deux brins d'égale longueur (bouts francs) ou bien présenter un brin plus long que l'autre de quelques nucléotides (bouts collants).
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