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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.7
V. Morice
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Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 5 - Les nucléases | | |
5.5 - Tampons d’incubation (restriction)
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| BG 22/1 |
- Différents tampons sont utilisés pour les enzymes de restriction permettant l’optimisation des réactions de multiples enzymes avec le même tampon.
- Toutes les enzymes de restriction nécessitent la présence de l’ion Mg++
- Le pH (7,0 - 7,9), le potentiel d’oxydo-réduction (dithiothréitol 1 mM), la force ionique (NaCl ou CH3COOK de 0 à 100 mM) varient d’un tampon à l’autre.
- De rares enzymes nécessitent des conditions spéciales précisées par leur mode d’emploi.
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