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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.7
V. Morice
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Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 5 - Les nucléases | | |
5.4 - Restriction (réaction générale)
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| BG 22 |
- La réaction générale catalysée par les enzymes de restriction implique la présence dans le milieu réactionnel des facteurs suivants :
- Enzyme (3.1.21.n)
- Substrat : ADN double brin non digéré
- Produit : ADN double brin digéré
- Cofacteurs
- En général, seul le Mg++ est indispensable. Quelques endonucléases font appel à d’autres cofacteurs. Les enzymes de méthylation ont pour coenzyme la S-Adénosyl-Méthionine (S-Ado-Met).
- Des facteurs physiques contrôlent aussi ces réactions : pH, potentiel d’oxydoréduction, force ionique. L’énergie libre dégagée par l’hydrolyse est suffisamment importante pour que la réaction ne soit pratiquement pas réversible dans les conditions habituelles.
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