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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 5 - Les nucléases

 

5.27 - Nucléase S1

 

Image BG_40_PICT.jpg
BG 40

  • La nucléase S1 est une nucléase spécifique des ADN (ou ARN) simple brin, bien qu’à des concentrations élevées elle agisse aussi sur les hybrides. Elle agit en milieu acide, en présence d’ions Zinc.
  • La nucléase S1 est utilisée :
    • pour faire des bouts francs aux extrémités des fragments d’ADN double brin ;
    • pour hydrolyser les fragments d’ADN simple brin au niveau des brèches (même s’il ne manque qu’une seule liaison) ;
    • pour isoler les hybrides ADN:ARN lors de l’hybridation entre un gène et le cDNA correspondant ;
    • pour ouvrir les épingles à cheveux formées lors de la synthèse des cDNA.

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5.1 - Fragment de restriction (définition)
5.2 - Système de restriction-modification
5.3 - Nomenclature des enzymes de restriction
5.4 - Restriction (réaction générale)
5.5 - Tampons d’incubation (restriction)
5.6 - EcoR I
5.7 - EcoR V
5.8 - Pvu II
5.9 - Hae III
5.10 - Pvu I
5.11 - Pst I
5.12 - Kpn I
5.13 - Alphabet dégénéré
5.14 - Ava II
5.15 - Hind II
5.16 - Hga I
5.17 - Mbo II
5.18 - Hha I
5.19 - Hpa I
5.20 - Digestion d’une séquence (Hae III)
5.21 - Digestion d’une séquence (Mbo II)
5.22 - Ribonucléase A
5.23 - Ribonucléase T1
5.24 - Ribonucléase H
5.25 - Désoxyribonucléase I
5.26 - Nucléase BAL 31
5.27 - Nucléase S1
5.28 - Nuclease de mung-bean
5.29 - Exonucléase de phage λ
5.30 - Exonucléase III