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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 5 - Les nucléases

 

5.21 - Digestion d’une séquence (Mbo II)

 

Image BG_34_1_PICT.jpg
BG 34/1

  • Voici le résultat de la digestion du gène de l’apoA-II (brin codant) par Mbo II.
  • Mbo II est spécifique d’un site non palindromique donc dissymétrique : GAAGA (N)8/7. Chacune des séquences GAAGA engendre une coupure de l’ADN, à huit nucléotides coté 3’ du site. La séquence doit être recherchée sur les deux brins, ou bien on peut rechercher la séquence complémentaire TCTTC qui engendre une coupure à sept nucléotides coté 5’.
  • On peut établir des cartes des emplacements de ces sites sur l’ADN (cartes de restriction).
  • La recherche de ces sites sur l’ADN extrait d’un sujet permet de détecter des séquences différentes qui ajoutent ou suppriment des sites de restriction. Il en résulte que les fragments de restriction chez ces individus n’ont pas la même longueur que les mêmes fragments chez les autres individus : il y a un polymorphisme de longueur des fragments de restriction (RFLP = Restriction Fragment Length Polymorphism).

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5.1 - Fragment de restriction (définition)
5.2 - Système de restriction-modification
5.3 - Nomenclature des enzymes de restriction
5.4 - Restriction (réaction générale)
5.5 - Tampons d’incubation (restriction)
5.6 - EcoR I
5.7 - EcoR V
5.8 - Pvu II
5.9 - Hae III
5.10 - Pvu I
5.11 - Pst I
5.12 - Kpn I
5.13 - Alphabet dégénéré
5.14 - Ava II
5.15 - Hind II
5.16 - Hga I
5.17 - Mbo II
5.18 - Hha I
5.19 - Hpa I
5.20 - Digestion d’une séquence (Hae III)
5.21 - Digestion d’une séquence (Mbo II)
5.22 - Ribonucléase A
5.23 - Ribonucléase T1
5.24 - Ribonucléase H
5.25 - Désoxyribonucléase I
5.26 - Nucléase BAL 31
5.27 - Nucléase S1
5.28 - Nuclease de mung-bean
5.29 - Exonucléase de phage λ
5.30 - Exonucléase III