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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.8
V. Morice
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Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 5 - Les nucléases | | |
5.21 - Digestion d’une séquence (Mbo II)
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| BG 34/1 |
- Voici le résultat de la digestion du gène de l’apoA-II (brin codant) par Mbo II.
- Mbo II est spécifique d’un site non palindromique donc dissymétrique : GAAGA (N)8/7. Chacune des séquences GAAGA engendre une coupure de l’ADN, à huit nucléotides coté 3’ du site. La séquence doit être recherchée sur les deux brins, ou bien on peut rechercher la séquence complémentaire TCTTC qui engendre une coupure à sept nucléotides coté 5’.
- On peut établir des cartes des emplacements de ces sites sur l’ADN (cartes de restriction).
- La recherche de ces sites sur l’ADN extrait d’un sujet permet de détecter des séquences différentes qui ajoutent ou suppriment des sites de restriction. Il en résulte que les fragments de restriction chez ces individus n’ont pas la même longueur que les mêmes fragments chez les autres individus : il y a un polymorphisme de longueur des fragments de restriction (RFLP = Restriction Fragment Length Polymorphism).
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