médecine
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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 5 - Les nucléases

 

5.19 - Hpa I

 

Image BG_33_PICT.jpg
BG 33

  • Hpa I est une enzyme de restriction produite par Haemophilus parainfluenzae.
  • Le site de liaison à l’ADN est formé de six paires de nucléotides :
    5’ GTTAAC 3’
    3’ CAATTG 5’

  • Les sites de restriction sont souvent de type palindrome, c’est à dire qu’ils sont identiques sur les deux brins de l’ADN (mais antiparallèles sur l’autre brin). Lorsque l’hydrolyse des liaisons phosphodiester se fait au centre de symétrie du palindrome toutes les paires de nucléotides restent appariées : les fragments qui en résultent sont dits « à bouts francs ».
  • La méthylation de la deuxième adénine de la séquence inhibe la reconnaissance du site par Hpa I. L’ADN de la bactérie ainsi méthylé n’est pas hydrolysé alors que l’ADN parasite qui n’est pas méthylé sera hydrolysé.

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5.1 - Fragment de restriction (définition)
5.2 - Système de restriction-modification
5.3 - Nomenclature des enzymes de restriction
5.4 - Restriction (réaction générale)
5.5 - Tampons d’incubation (restriction)
5.6 - EcoR I
5.7 - EcoR V
5.8 - Pvu II
5.9 - Hae III
5.10 - Pvu I
5.11 - Pst I
5.12 - Kpn I
5.13 - Alphabet dégénéré
5.14 - Ava II
5.15 - Hind II
5.16 - Hga I
5.17 - Mbo II
5.18 - Hha I
5.19 - Hpa I
5.20 - Digestion d’une séquence (Hae III)
5.21 - Digestion d’une séquence (Mbo II)
5.22 - Ribonucléase A
5.23 - Ribonucléase T1
5.24 - Ribonucléase H
5.25 - Désoxyribonucléase I
5.26 - Nucléase BAL 31
5.27 - Nucléase S1
5.28 - Nuclease de mung-bean
5.29 - Exonucléase de phage λ
5.30 - Exonucléase III