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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.7
V. Morice
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Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 5 - Les nucléases | | |
5.15 - Hind II
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| BG 29 |
- Hind II est une enzyme de restriction produite par Haemophilus influenzae, souche Rd.
- Le site de liaison à l’ADN est formé de six paires de nucléotides :
| 5’ GTYRAC 3’ |
| 3’ CARYTG 5’ |
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- Les sites de restriction sont souvent de type palindrome, c’est à dire qu’ils sont identiques sur les deux brins de l’ADN (mais antiparallèles sur l’autre brin). Lorsque l’hydrolyse des liaisons phosphodiester se fait au centre de symétrie du palindrome toutes les paires de nucléotides restent appariées : les fragments qui en résultent sont dits « à bouts francs ».
- La méthylation de l’adénine du site d’hydrolyse inhibe la reconnaissance du site par Hind II. L’ADN de la bactérie ainsi méthylé n’est pas hydrolysé alors que l’ADN parasite qui n’est pas méthylé sera hydrolysé.
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