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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 2 - Les polymérases

 

2.1 - DNA polymérase (réaction)

 

Image BG_05_PICT.jpg
BG 05

  • Les DNA-polymérases sont des enzymes du noyau cellulaire qui agissent en phase S du cycle pour doubler systématiquement l’ensemble du génome diploïde.
  • D’autres DNA polymérases interviennent dans la synthèse des amorces RNA/DNA, dans la réplication du génome mitochondrial ou dans la réparation du DNA.
  • Elles ne peuvent démarrer la condensation des nucléotides que sur la fonction alcool en 3’ du ribose du dernier nucléotide d’une amorce, nucléotide qui doit être hybridé avec le nucléotide complémentaire qui sert de modèle.
  • Elles utilisent comme substrats des désoxyribonucléotides triphosphates (dATP, dCTP, dGTP et dTTP) et des amorces de RNA et de DNA synthétisées par une primase (RNA polymérase capable de synthétiser un brin de RNA complémentaire d’un brin de DNA sur 10 nucléotides) suivie d’une DNA polymérase α (qui prolonge l’amorce de RNA de 20 désoxyribonucléotides environ).
  • Elles synthétisent l’ADN nouveau par fragments qui, après excision des amorces, sont liés entre eux par une DNA-ligase.
  • Elles ont aussi une activité exonucléasique, qui leur permet en particulier d’hydrolyser le dernier nucléotide en 3’ du brin synthétisé si celui-ci ne s’apparie pas correctement avec le nucléotide complémentaire du brin modèle.

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2.1 - DNA polymérase (réaction)
2.2 - DNA polymérase (exonucléase 3’→5’)
2.3 - DNA polymérase (fonction d’édition)
2.4 - DNA-polymérases (tableau)
2.5 - DNA pol I (E. Coli)
2.6 - Fragment de Klenow
2.7 - T4 DNA polymérase
2.8 - Sequenase
2.9 - Taq polymérase
2.10 - Reverse transcriptase
2.11 - RNA polymérase II (réaction)
2.12 - RNA polymérases (phages)
2.13 - Poly(A) polymérase