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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


Tous droits de reproduction réservés aux auteurs


traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 2 - Les polymérases

 

2.9 - Taq polymérase

 

Image BG_10_PICT.jpg
BG 10

  • Thermus aquaticus est une bactérie thermophile des sources chaudes du parc de Yellowstone (Californie). Elle possède des enzymes thermorésistantes, dont une DNA polymérase (Taq polymérase) résistante à l’ébullition et active à 75-80 °C. La Taq polymérase est dépourvue d’activités d’édition (5’→3’ exonucléase et 3’ 5’ exonucléase).
  • La Taq polymérase est inhibée par les ions phosphates.
  • La Taq polymérase est utilisée pour la réaction de polymérisation en chaîne (Polymerase Chain Reaction = PCR), technique courante d’amplification des fragments de DNA. Parce qu’elle est dépourvue d’activités d’édition la Taq polymérase est responsable de nombreux misappariements : de l’ordre de 1 pour 100 paires de bases.

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2.1 - DNA polymérase (réaction)
2.2 - DNA polymérase (exonucléase 3’→5’)
2.3 - DNA polymérase (fonction d’édition)
2.4 - DNA-polymérases (tableau)
2.5 - DNA pol I (E. Coli)
2.6 - Fragment de Klenow
2.7 - T4 DNA polymérase
2.8 - Sequenase
2.9 - Taq polymérase
2.10 - Reverse transcriptase
2.11 - RNA polymérase II (réaction)
2.12 - RNA polymérases (phages)
2.13 - Poly(A) polymérase