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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.7 V. Morice
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Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques Chapitre 2 - Les polymérases | | |
2.9 - Taq polymérase
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- Thermus aquaticus est une bactérie thermophile des sources chaudes du parc de Yellowstone (Californie). Elle possède des enzymes thermorésistantes, dont une DNA polymérase (Taq polymérase) résistante à l’ébullition et active à 75-80 °C. La Taq polymérase est dépourvue d’activités d’édition (5’→3’ exonucléase et 3’ 5’ exonucléase).
- La Taq polymérase est inhibée par les ions phosphates.
- La Taq polymérase est utilisée pour la réaction de polymérisation en chaîne (Polymerase Chain Reaction = PCR), technique courante d’amplification des fragments de DNA. Parce qu’elle est dépourvue d’activités d’édition la Taq polymérase est responsable de nombreux misappariements : de l’ordre de 1 pour 100 paires de bases.
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