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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


Tous droits de reproduction réservés aux auteurs


traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 2 - Les polymérases

 

2.8 - Sequenase

 

Image BG_09_PICT.jpg
BG 09

  • Les séquenases sont une famille d’enzymes issues de la DNA polymérase du bactériophage T7. Elles sont constituées d’une protéine du phage (gène 5) et d’une protéine de la cellule-hôte (thioredoxine). Elles sont dépourvues par une modification du gène de toute activité d’édition (5’→3’ exonucléase et 3’→5’ exonucléase).
  • Les séquenases sont les plus rapides de toutes les DNA polymérases.
  • Les séquenases sont utilisées dans les techniques de séquençage avec des didésoxyribonucléotides (Sanger). Elles sont responsables de quelques erreurs à défaut d’activité d’édition : de l’ordre de 1 misappariement pour 1000 paires de bases.

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2.1 - DNA polymérase (réaction)
2.2 - DNA polymérase (exonucléase 3’→5’)
2.3 - DNA polymérase (fonction d’édition)
2.4 - DNA-polymérases (tableau)
2.5 - DNA pol I (E. Coli)
2.6 - Fragment de Klenow
2.7 - T4 DNA polymérase
2.8 - Sequenase
2.9 - Taq polymérase
2.10 - Reverse transcriptase
2.11 - RNA polymérase II (réaction)
2.12 - RNA polymérases (phages)
2.13 - Poly(A) polymérase