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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 2 - Les polymérases

 

2.5 - DNA pol I (E. Coli)

 

Image BG_07_PICT.jpg
BG 07

  • La DNA polymérase I d’Escherichia coli (DNA pol I) est une protéine qui assure la fonction de réplication de l’ADN bactérien.
  • Elle initie la réaction à l’extrémité 3’ rentrante d’une amorce d’ADN ou d’ARN. Elle incorpore des nucléotides à partir des quatre désoxyribonucléosides triphosphates, en hydrolysant un pyrophosphate et en incorporant le nucléoside et le phosphate α. Lorsque cet atome de phosphore est radioactif, le brin d’ADN produit est aussi marqué.
  • DNA pol I est douée d’une double fonction d’édition :
    • exonucléase 5’→3’ pour digérer le deuxième brin à partir de son extrémité 5’ (nick translation)
    • exonucléase 3’→5’ pour digérer l’extrémité 3’ d’un brin (correction immédiate des misappariements)
  • Les activités d’exonucléase s’exercent aussi sur les brins d’ARN hybridés (amorces).
  • DNA pol I est utilisée pour la synthèse de brins d’ADN marqués sur toute la longueur de la chaîne par la technique de translation de brèche avec des dNTP marqués.

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2.1 - DNA polymérase (réaction)
2.2 - DNA polymérase (exonucléase 3’→5’)
2.3 - DNA polymérase (fonction d’édition)
2.4 - DNA-polymérases (tableau)
2.5 - DNA pol I (E. Coli)
2.6 - Fragment de Klenow
2.7 - T4 DNA polymérase
2.8 - Sequenase
2.9 - Taq polymérase
2.10 - Reverse transcriptase
2.11 - RNA polymérase II (réaction)
2.12 - RNA polymérases (phages)
2.13 - Poly(A) polymérase