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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.7
V. Morice
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Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 2 - Les polymérases | | |
2.5 - DNA pol I (E. Coli)
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| BG 07 |
- La DNA polymérase I d’Escherichia coli (DNA pol I) est une protéine qui assure la fonction de réplication de l’ADN bactérien.
- Elle initie la réaction à l’extrémité 3’ rentrante d’une amorce d’ADN ou d’ARN. Elle incorpore des nucléotides à partir des quatre désoxyribonucléosides triphosphates, en hydrolysant un pyrophosphate et en incorporant le nucléoside et le phosphate α. Lorsque cet atome de phosphore est radioactif, le brin d’ADN produit est aussi marqué.
- DNA pol I est douée d’une double fonction d’édition :
- exonucléase 5’→3’ pour digérer le deuxième brin à partir de son extrémité 5’ (nick translation)
- exonucléase 3’→5’ pour digérer l’extrémité 3’ d’un brin (correction immédiate des misappariements)
- Les activités d’exonucléase s’exercent aussi sur les brins d’ARN hybridés (amorces).
- DNA pol I est utilisée pour la synthèse de brins d’ADN marqués sur toute la longueur de la chaîne par la technique de translation de brèche avec des dNTP marqués.
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