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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 2 - Les polymérases

 

2.4 - DNA-polymérases (tableau)

 

Image BG_06_PICT.jpg
BG 06

  • Les DNA polymérases sont des enzymes qui catalysent la synthèse de l’ADN à partir des désoxyribonucléosides triphosphates en recopiant la séquence d’une matrice d’ADN. Certaines d’entre elles ont aussi des activités d’exonucléase qui peuvent s’exercer de 5’ vers 3’ ou dans l’autre sens, afin de corriger les erreurs d’incorporation (fonction d’édition). Les DNA polymérases sont spécifiques de l’ADN double brin et incorporent les nucléotides pour faire la synthèse d’un deuxième brin en utilisant le premier comme matrice. Les DNA polymérases ont besoin d’une amorce (extrémité 3’OH « rentrante » d’un deuxième brin) pour initier la réaction.
  • Tous les êtres vivants ont besoin d’une DNA polymérase pour la réplication de leur ADN. Ce sont en général des protéines d’environ 100000 daltons. Celles des êtres vivants les plus simples (virus, archéobactéries) sont souvent dépourvues de fonctions d’édition. Toutes les DNA polymérases exigent la présence de l’ion magnésium. Beaucoup d’entre elles fonctionnent en milieu alcalin. Leur température optimale d’action se situe habituellement dans une fourchette de 20 à 40 °C.

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2.1 - DNA polymérase (réaction)
2.2 - DNA polymérase (exonucléase 3’→5’)
2.3 - DNA polymérase (fonction d’édition)
2.4 - DNA-polymérases (tableau)
2.5 - DNA pol I (E. Coli)
2.6 - Fragment de Klenow
2.7 - T4 DNA polymérase
2.8 - Sequenase
2.9 - Taq polymérase
2.10 - Reverse transcriptase
2.11 - RNA polymérase II (réaction)
2.12 - RNA polymérases (phages)
2.13 - Poly(A) polymérase