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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.7 V. Morice
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Partie IV - Le génie génétique Chapitre 13 - Transposition - recombinaison | | |
13.3 - Transposition (mécanisme)
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| BG 94/1 |
- La transposition est l’insertion d’une séquence entière d’ADN, provenant d’un ADN viral ou d’un ARN cytoplamique rétrotranscrit.
- Les transposons des virus sont des fragments d’ADN double brin terminés par des séquences répétées inverses (la même séquence de 5’→3’ d’un côté et de 3’→5’ de l’autre côté). Les rétrotransposons sont obtenus par la transcriptase réverse des rétrovirus à partir d’ARN cytoplamiques : les cDNA obtenus seront transposés dans l’ADN de la cellule hôte.
- Dans les deux cas l’ADN du site de transposition sera ouvert par deux brèches sur les brins de l’ADN décalées de dix à vingt nucléotides, créant ainsi une coupure à brins inégaux. Le transposon va s’insérer entre ces deux extrémités, les vides laissés aux extrémités de l’ADN de l’hôte seront comblés par la DNA polymérase et les brèches restantes liées par la DNA ligase.
- Ainsi, l’ADN au niveau d’un transposon viral présente deux répétitions de même sens en dehors du transposon proprement dit qui est encadré par deux autres répétitions de sens inverse. Au niveau d’un rétrotransposon, on rencontre aussi deux répétitions de même sens en dehors du transposon proprement dit qui est terminé par une partie poly(dA:dT) issue de la rétrotranscription de la queue poly(A) de l’ARN d’origine.
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