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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie III - Caractérisation des événements génétiques
Chapitre 11 - Expression

 

11.8 - Polylinker

 

Image BG_86_PICT.jpg
BG 86

  • L’avantage de ce clonage directionnel ne peut être obtenu qu’avec des sites de restriction uniques et bien placés dans le fragment d’ADN qu’on veut transposer dans le vecteur.
  • Afin de disposer d’un maximum de possibilités, on construit des vecteurs dits de clonage, qui comportent des domaines riches en sites uniques de restriction et placés dans l’ordre inverse pour chaque paire de vecteurs. Ces domaines permettant des liaisons sur de multiples sites sont appelés « polylinkers ».
  • Ainsi la paire de plasmides M13mp18 et M13mp19, comporte dans leur structure des domaines formés de l’association successive de dix sites de restriction dans un sens et dans l’autre.

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11.1 - Vecteur (définition)
11.2 - Cellules-hôtes
11.3 - Cycle du phage λ
11.4 - Phage λ
11.5 - Clonage (I)
11.6 - Clonage (II)
11.7 - EMBL
11.8 - Polylinker
11.9 - Clonage directionnel
11.10 - Carte du plasmide pBR322
11.11 - Carte des plasmides pUC18/19
11.12 - Cycle de M13
11.13 - Carte du M13