médecine
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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie III - Caractérisation des événements génétiques
Chapitre 11 - Expression

 

11.7 - EMBL

 

Image BG_85_PICT.jpg
BG 85

  • Les phages EMBL3 et EMBL4 sont aussi des phages λ modifiés. Leur ADN fait 42364 paires de bases.
  • Des emplacements spécifiques ont été préparés dans ces phages pour pouvoir y introduire des fragments d’ADN à amplifier. Pour EMBL3, un de ces emplacements se situe après le gène J et comprend les uns à la suite des autres trois sites de restriction : Sal I, BamH I et EcoR I ; l’autre emplacement se situe sur le brin antiparallèle et comprend les mêmes sites de restriction.
  • Pour EMBL4 l’organisation est la même mais les sites de restriction sont dans l’ordre inverse : EcoR I, BamH I et Sal I.
  • L’intérêt de tels sites est de permettre l’incorporation d’un ADN en contrôlant le sens de la transposition. Imaginez un fragment d’ADN limité d’un coté par Sal I et de l’autre par EcoR I. En digérant le phage par les mêmes enzymes puis en recombinant le phage avec ce fragment d’ADN on obtiendra une transposition dans un sens pour EMBL3 et dans l’autre sens pour EMBL4 (clonage directionnel).

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11.1 - Vecteur (définition)
11.2 - Cellules-hôtes
11.3 - Cycle du phage λ
11.4 - Phage λ
11.5 - Clonage (I)
11.6 - Clonage (II)
11.7 - EMBL
11.8 - Polylinker
11.9 - Clonage directionnel
11.10 - Carte du plasmide pBR322
11.11 - Carte des plasmides pUC18/19
11.12 - Cycle de M13
11.13 - Carte du M13