médecine
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Biologie génique

Plan du cours

Objectifs

I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques

1 - Phosphorylation - déphosphorylation

2 - Les polymérases

3 - Les ligases

4 - Les isomérases

5 - Les nucléases

6 - Autres enzymes

II - Préparation des acides nucléiques

7 - Extraction et purification

8 - Synthèse des polynucléotides

9 - Caractérisation des acides nucléiques

III - Caractérisation des événements génétiques

10 - Mutations

11 - Expression

IV - Le génie génétique

12 - Mutagénèse

13 - Transposition - recombinaison

14 - Construction de vecteurs

15 - Transgénèse


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traduction HTML V2.8
V. Morice


Partie III - Caractérisation des événements génétiques
Chapitre 11 - Expression

 

11.12 - Cycle de M13

 

Image BG_90_PICT.jpg
BG 90

  • Le bactériophage M13 est un phage dont la forme libre est constituée d’une membrane entourant un ADN simple brin de 6,4 kilobases.
  • La transfection des bactéries par M13 et l’expression du virus dépendent de la présence d’un chromosome surnuméraire bactérien (épisome F) : la présence de cet épisome permet le cycle normal du phage : synthèse d’un brin d’ADN complémentaire, réplication et en fin de cycle synthèse spécifique d’un seul des deux brins de l’ADN (brin +) qui sera pourvu d’une membrane et sécrété hors de la cellule.
  • Lorsque l’épisome ne contient pas les gènes permettant ce cycle (épisome F’), l’ADN du phage s’incorpore sous la forme d’un ADN double brin capable d’exprimer les gènes qu’il contient ou qu’on a inséré dans sa structure, par exemple la β-galactosidase. Les bactéries avec l’épisome F’ sont des variétés commercialisées pour permettre l’expression des gènes clonés dans le phage M13.
  • Le phage M13 existant sous la forme d’un ADN simple brin, il est possible d’y insérer des brins d’ADN d’un gène particulier présent à l’état hétérozygote chez l’homme : dans ce cas chaque phage ne peut insérer qu’un seul des deux allèles et les deux allèles se retrouvent dans des colonies séparées.

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11.1 - Vecteur (définition)
11.2 - Cellules-hôtes
11.3 - Cycle du phage λ
11.4 - Phage λ
11.5 - Clonage (I)
11.6 - Clonage (II)
11.7 - EMBL
11.8 - Polylinker
11.9 - Clonage directionnel
11.10 - Carte du plasmide pBR322
11.11 - Carte des plasmides pUC18/19
11.12 - Cycle de M13
11.13 - Carte du M13