Partie III - Caractérisation des événements génétiques
Chapitre 10 - Mutations

10.4 - Cartes de restriction

BG 79

• Les marqueurs génétiques peuvent aussi caractériser les ADN responsables des maladies héréditaires grâce aux cartes de restriction.
• L’ADN du malade est digéré par de nombreuses enzymes de restriction isolément ou associées entre elles. Les fragments de restriction sont reconnus par une sonde spécifique du gène responsable de la maladie. Il en résulte un grand nombre de fragments possibles dont les longueurs (en kilobases) sont mesurées par électrophorèse à coté d’un marqueur de masse moléculaire.
• Ainsi, le DNA d’un malade atteint d’une dyslipoprotéinémie et celui d’un témoin sain ont été digérés par BamH I : le sujet sain montre un seul fragment long de 11,65 kb reconnaissable par la sonde du gène de l’apoA-I, alors que l’ADN du malade en montre deux de 7,5 et 10,25 kb. Le fragment BamH I du sujet témoin peut encore être digéré par d’autres enzymes donnant à chaque fois deux fragments (Dde I) ou trois (Hind III) ou quatre (Pst I).
• Les fragments peuvent être comparés comme les morceaux d’un puzzle pour obtenir une carte des emplacements des sites de restriction sur l’ADN. La même carte, chez le sujet malade, montre les mêmes sites de restriction aux deux extrémités du fragment BamH I, mais il apparaît une insertion de 6 kb au milieu du gène de l’apoA-I avec des sites nouveaux : BamH I, EcoR I, Pst I non retrouvés chez le témoin. Cette insertion est responsable d’une absence d’expression de l’apoA-I ce qui se traduit par une dyslipoprotéinémie.