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Plan du cours Objectifs I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques 1 - Phosphorylation - déphosphorylation 2 - Les polymérases 3 - Les ligases 4 - Les isomérases 5 - Les nucléases 6 - Autres enzymes II - Préparation des acides nucléiques 7 - Extraction et purification 8 - Synthèse des polynucléotides 9 - Caractérisation des acides nucléiques III - Caractérisation des événements génétiques 10 - Mutations 11 - Expression IV - Le génie génétique 12 - Mutagénèse 13 - Transposition - recombinaison 14 - Construction de vecteurs 15 - Transgénèse
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traduction HTML V2.7
V. Morice
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Partie I - Enzymes agissant sur les acides nucléiques
Chapitre 1 - Phosphorylation - déphosphorylation | | |
1.1 - Polynucléotide-kinase
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| BG 01 |
- La polynucléotide kinase catalyse le transfert du phosphate γ de l’ATP sur une fonction alcool du carbone 5’ d’un ADN ou d’un ARN. Le substrat requiert une déphosphorylation préalable si la fonction est estérifiée.
- L’enzyme catalyse aussi l’échange du phosphate 5’ terminal d’un ADN ou d’un ARN avec le phosphate γ de l’ATP, en présence d’ADP comme accepteur de phosphate.
- La polynucléotide kinase du commerce est extraite d’une bactérie (E. coli) infectée par le phage T4. Une unité d’enzyme catalyse le transfert de 33 picomoles de phosphate par minute à 37 °C.
- La polynucléotide kinase est utilisée au laboratoire pour incorporer du phosphate radioactif (32P) sur l’extrémité 5’ d’un acide nucléique, soit par transfert, soit par échange.
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